Coombs-testen
Hvad er en Coombs-test?
Coombs-testen bruges til at detektere antistoffer mod røde blodlegemer (erythrocytter). Et såkaldt Coombs-serum bruges til at bestemme antistofferne.Det opnås fra serumet fra kaniner og er sensibiliseret for humane antistoffer.
Testen bruges, hvis der er mistanke om hæmolytisk anæmi, rhesus-inkompatibilitet eller kort før en blodtransfusion mistænkes. Hemolytisk anæmi er en form for anæmi, og rhesus-inkompatibilitet beskriver en uforenelighed med blodgrupper.
Der er to forskellige typer Coombs-test, den direkte og indirekte test er forskellige med hensyn til indikation og udførelse.
Årsagerne til en Coombs-test
Den direkte Coombs-test bruges, hvis der er mistanke om hæmolytisk anæmi. Hemolytisk anæmi beskriver anæmi, hvor blodcellerne nedbrydes for tidligt på grund af skader.
Ved autoimmune sygdomme såsom systemisk lupus erythematosus, reumatoid arthritis eller kronisk lymfatisk leukæmi dannes antistoffer, der er rettet mod kroppens egne blodceller (såkaldte erythrocytter). Bindingen af antistofferne fører til den tidlige nedbrydning af blodcellerne eller til en sammenklumpning af blodcellerne i karene. Begge disse fører til et fald i hæmoglobinværdien.
En anden indikation for den direkte Coombs-test er hæmolyticus neonatorum sygdom, her dannes antistoffer mod rhesusfaktoren i kroppen af den rhesus-negative mor. Hvis det ufødte barn er rhesus-positivt, kan antistofferne fra moderen komme ind i fosterets cirkulation og indlede en øget nedbrydning af blodcellerne der. Nyfødte skiller sig ud med svær anæmi og gulsot.
Coombs-testen bruges regelmæssigt i transfusionsmedicin. Det bruges til at bestemme blodgrupper inden en blodtransfusion (sengeprøven), hvor en lille blodprøve blandes med forskellige sera fra blodgrupper A, B, AB og 0. Hvis blodet forbliver flydende, er patientens blod kompatibelt med den tilsvarende blodgruppe. Transfusionen kan udføres.
Den indirekte Coombs-test kan også bruges til at søge efter frie antistoffer i patientens krop (antistofsøgningstest), f.eks. under barselundersøgelser som forberedelse til en transfusion til onkologiske patienter eller personer, der allerede har modtaget en blodtransfusion.
Find ud af alt om emnet her: Rh intolerance.
Forberedelsen
Som forberedelse til Coombs-testen fremstilles først sera med antistoffer, der skal testes for. De udfyldes i forskellige prøverør eller påføres testkort.
I daglig klinisk praksis f.eks. med sengeprøven er der allerede forberedte testkort, der kan bruges med det samme. Dernæst trækkes blod fra patienten og forberedes til testen. Afhængig af hvilken type Coombs-test, der udføres, har man brug for blodcellerne eller serumet (flydende del af blodet) fra patienten.
Sekvensen
Hvis der udføres en direkte Coombs-test, filtreres de røde blodlegemer ud af patientens blod. Det skal testes, om der er antistoffer af IgG-typen på dem, der forårsager hæmolytisk anæmi eller blodgruppens uforenelighed i kroppen. Coombs-serumet indeholder antistoffer mod humane IgG-antistoffer. Blandingen opvarmes (inkuberes) i lang tid. Hvis der er antistoffer på de røde blodlegemer, klumper de sig sammen, og testen bliver positiv.
Den indirekte Coombs-test består af to dele. Målet er at bestemme antistoffer, der er frie i blodet og ikke er bundet til blodlegemer.
Denne gang filtreres den flydende del (serum) fra patientens blod. Først sættes røde blodlegemer til serumet til testen. Hvis der er frie antistoffer i serumet, binder de sig til de røde blodlegemer. Denne reaktion er ikke synlig. Kun i det andet trin, som i den direkte Coombs-test, tilføjes og opvarmes Coombs-serum med antistoffer mod humane antistoffer. Også her klumper løsningen sig, hvis resultatet er positivt.
Evalueringen
Hvis antistoffer kombineres med et passende Cooms-serum, binder antistoffer i serumet (flydende del af blodet) med patientens antistoffer. Antistoffer er Y-formet, hvilket betyder, at de altid kan binde to bindingspartnere og dermed tværbinde røde blodlegemer med hinanden. Der oprettes en stor ophobning af blodlegemer. Disse klumper bliver synlige - blodet agglutinater (klumper), og testen er positiv.
Hvis patienten ikke har de passende antistoffer, forbliver serumet flydende. Du kan ikke se nogen ændring - testen er negativ.
Hvad er alternativerne?
Et alternativ til Coombs-testen er den immunologiske ELISA-metode (enzymbundet immunosorbentassay), hvor visse antistoffer er markeret med et enzym. Dette antistof sættes til testopløsningen. Hvis de mærkede antistoffer reagerer med antistofferne i testopløsningen, aktiveres det bundne enzym og producerer et farvestof. Tilsvarende reagensglas ændrer farve - testen er positiv.
Foruden ELISA-proceduren findes der også Western blot, som ofte bruges som en bekræftende test for en positiv ELISA.